CHO細胞培養(yǎng)說明

產(chǎn)品名稱：CHO細胞

中文名稱：中國倉鼠卵巢細胞(Chinese hamster ovary)

種屬：倉鼠

組織來源 卵巢

生長狀態(tài) 貼壁生長

細胞形態(tài) 上皮樣

CHO細胞具有不死性,可以傳代百代以上

CHO細胞培養(yǎng)

1、培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基類型：DMEM（Hyclone SH30243.01)培養(yǎng)基

FBS（GIBCO 16000-044): 10%

抗生素：雙抗

培養(yǎng)條件：37℃，CO2: 5%

2、傳代方法：

收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：

如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

如果細胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁細胞傳代方法：

1 ）棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2 ）加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)，隨時觀察細胞狀態(tài)變化，待細胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。

1）直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

2）離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

 一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二。

3、凍存方法：

70% *培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

儲存：液氮中長期保存。

4、注意事項

1 ）觀察細胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度。

2 ）在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

3 ）收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等，請拍照并在一周內(nèi)與我們。

來源：慧穎細胞庫 整理編輯