B16細胞培養

準備工作

準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試等。

取材

在無菌環境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定），經過一定的處理（如消化分散細胞、分離等）后接入培養器血中，這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的培養稱為原代培養。理論上講各種動物和人體內的所有組織都可以用于培養，實際上幼體組織（尤其是胚胎組織）比成年個體的組織容易培養，分化程度低的組織比分化高的容易培養，腫瘤組織比正常組織容易培養。取材后應立即處理，盡快培養，因故不能馬上培養時，可將組織塊切成黃豆般大的小塊，置4℃的培養液中保存。取組織時應嚴格保持無菌，同時也要避免接觸其他的有害物質。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時容易帶菌，為減少污染可用抗菌素處理。

培養

將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養。如系組織塊培養，則直接將組織塊接入培養器皿底部，幾個小時后組織塊可貼牢在底部，再加入培養基。如系細胞培養，一般應在接入培養器皿之前進行細胞計數，按要求以一定的量（以每毫升細胞數表示）接入培養器皿并直接加入培養基。細胞進入培養器皿后，立即放入培養箱中，使細胞盡早進入生長狀態。

正在培養中的細胞應每隔一定時間觀察一次，觀察的內容包括細胞是否生長良好，形態是否正常，有無污染，培養基的PH 是否太酸或太堿（由酚紅指示劑指示），此外對培養溫度和CO2 濃度也要定時檢查。

一般原代培養進入培養后有一段潛伏期（數小時到數十天不等），在潛伏期細胞一般不分裂，但可貼壁和游走。過了潛伏期后細胞進入旺盛的分裂生長期。細胞長滿瓶底后要進行傳代培養，將一瓶中的細胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續培養。每傳代一次稱為“一代”。二倍體細胞一般只能傳幾十代，而轉化細胞系或細胞株則可無限地傳代下去。轉化細胞可能具有惡性性質，也可能僅有不死性（Immortality）而無惡性。培養正在生長中的細胞是進行各種生物醫學實驗的良好材料。

凍存及復蘇

為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度－196℃，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑（一般為二甲亞砜或甘油）的培養基，以一定的冷卻速度凍存，zui終保存于液氮中。在極低的溫度下，細胞保存的時間幾乎是無限的。

復蘇一般采用快融方法，即從液氮中取出凍存管后，立即放入37℃水中，使之在一分鐘內迅速融解。然后將細胞轉入培養器皿中進行培養。

凍存過程中保護劑的選用、細胞密度、降溫速度及復蘇時溫度、融化速度等都對細胞活力有影響。

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HS77人小細胞肺癌

HSC人雪旺細胞

HSC-T6大鼠肝星形細胞

HT-1080人纖維肉瘤

HT29人結腸癌細胞系

HuH-6人肝母細胞瘤細胞

HUH-7人肝癌細胞

HuT 78人T淋巴細胞白血病細胞

Hut102人皮膚T細胞淋巴瘤

HUVEC- C人臍靜脈血管內皮原代細胞

HUVEC-C人臍靜脈血管內皮細胞株

IEC-18大鼠回腸細胞

IMR-32人神經母細胞瘤細胞

INS-1大鼠胰島瘤細胞

Ishikeuva人子宮內膜癌細胞

J558L鼠骨髓瘤

J82人膀胱移行細胞癌

JAR人胎盤絨毛癌細胞

JEC人子宮內膜腺癌細胞

JEG 人絨癌細胞

JEG-3人絨毛膜癌細胞

JeKo-1人套細胞淋巴瘤細胞

Jurkat人急性T細胞白血病

Jurkat, Clone E6-1人T淋巴細胞白血病細胞

K562 人慢性髓原白血病細胞

K7M2-WT小鼠骨肉瘤成骨細胞

KB人口腔表皮樣癌細胞

KG1a人髓系白血病細胞

KM-12人大腸癌細胞

KM202L人卵巢癌細胞

KP1人胰腺癌細胞

KP2人胰腺癌細胞

KP3人胰腺癌細胞

KP4人胰腺癌細胞

KP-N-NS人腎上腺神經母細胞瘤細胞(腦轉移)

KU812人外周血嗜堿性白血病細胞

KURAMOCHI人卵巢癌細胞

kyse-140人食管癌細胞

Kyse450人食管癌細胞

KYSE-510人食管癌細胞

L Wnt-3A小鼠皮下結締組織細胞

L-02人正常肝細胞

L1210小鼠白血病細胞

L5178Y 小鼠淋巴瘤細胞

L6大鼠成肌細胞

L6565小鼠白血病克隆細胞系

L78人肺腺鱗癌細胞

L929小鼠成纖維細胞

LAX人肺腺癌

Lec1倉鼠卵巢細胞

LECPα-1 人肺癌細胞

Lewis小鼠肺癌細胞

Li-7人肝癌細胞

LLC小鼠肺癌細胞

LLC-MK2恒河猴腎細胞

lncap人前列腺癌細胞

LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞

LO2人正常肝細胞

LoVo人結腸癌細胞

LS-174-T人結腸腺癌細胞

LTEP-A2人肺腺癌

LX-2人肝星形細胞

MA-104恒河猴腎細胞

MC3T3-E1小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14

MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14

MCF-10A人正常乳腺上皮細胞

MCF7 人乳腺癌細胞

MDA-MB-231人乳腺腺癌

MDA-MB-415人乳腺腺癌細胞

MDA-MB-435人乳腺癌高轉移細胞

MDA-MB-435S人乳腺導管癌

MDA-MB-436人乳腺腺癌細胞

MDA-MB-453人乳腺癌細胞

MDA-MB-468人乳腺癌細胞

MDBK (NBL-1)牛腎細胞

MDCK狗腎細胞

MDCK(NBL-2)狗腎細胞

ME12人前列腺癌

ME-180人子宮頸表皮癌細胞

MEF小鼠胚胎成纖維細胞

MFC小鼠胃癌細胞

MG-63人骨頭肉瘤細胞

MGC80-3人胃癌細胞

MHCC97-H高轉移人肝癌細胞

Miapaca2人胰腺癌細胞

MKN-28人胃癌細胞

MKN-45人胃癌細胞

MLTC-1小鼠睪丸間質細胞瘤細胞

MNK-7人乳癌

MNNG/HOS Cl人骨肉瘤細胞

MOLT-4人急性淋巴母細胞白血病細胞

MR1中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤

MRC-5人胚肺細胞

MS1小鼠胰島內皮細胞

MS751人子宮頸表皮癌細胞

MSTO-211H人肺癌細胞株

Mv.1.Lu(NBL-7)貂肺上皮細胞

NAMALWA人Burkitt's淋巴瘤細胞

NCI-H1299人非小細胞肺癌細胞

NCI-H1395人肺腺癌細胞

NCI-H1650人非小細胞肺癌細胞

NCI-H1975人肺腺癌細胞

NCI-H2452人間皮瘤細胞

NCI-H292人肺癌細胞(淋巴結轉移)

NCI-H358人非小細胞肺癌細胞

NCI-H446人小細胞肺癌細胞

NCI-H460人大細胞肺癌細胞

NCI-H661人大細胞肺癌細胞

NCI-H716人結直腸腺癌細胞

NCI-N87人胃癌細胞

NCTC clone 929小鼠成纖維細胞

Neuro-2a小鼠腦神經瘤細胞

NIH/3T3小鼠胚胎細胞

NIH-3T3-L1小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪)

NIT-1β小鼠胰島素瘤β細胞

NP69人永生化鼻咽上皮細胞系

NR8383大鼠肺泡巨噬細胞

NRC-5人胚肺

NRK大鼠腎細胞

NRK-52E大鼠腎細胞

OC3人卵巢癌細胞株

OK負鼠腎細胞

OKT 11雜交瘤細胞抗CD2

OKT 3雜交瘤(抗CD3)

OP9小鼠骨髓基質細胞

OS-RC-2人腎癌細胞

OV56人卵巢癌細胞

OV90人卵巢癌細胞

OVCAR3人卵巢癌細胞

OVCAR4人卵巢癌細胞

OVISE人卵巢癌細胞

OVSAHO人卵巢癌細胞

OVTOKO人卵巢癌細胞

P19小鼠畸胎瘤細胞

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]小鼠骨髓瘤細胞

P388小鼠淋巴樣瘤

P388D1小鼠淋巴樣瘤細胞

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細胞

P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤細胞h+急淋白血病細胞系